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猪脑心肌炎病毒RT-PCR检测试剂盒
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更新时间:2024-04-22  |  阅读:75

详情介绍

猪脑心肌炎病毒RT-PCR检测试剂盒


产品名称:猪脑心肌炎病毒RT-PCR检测试剂盒

脑心肌炎病毒(Encephalomyocarditis Virus,EMCV)在分类上属小 RNA 病毒科,心肌病毒属,是一种无囊膜的单股正链 RNA 病毒。由 EMCV 引起的猪脑心肌炎是猪的一种以脑炎、心肌炎或心肌周围炎为主要特征的急性传  染病,给养猪业造成了极大的经济损失。本产品适用于检测猪血清、脑、心肌以及  淋巴结等组织标本或病毒培养液中 EMCV 的 mRNA,适用于 EMCV 感染的辅助诊断。它具有下列特点:

1.       用于 EMCV 的定性鉴定检测和分子流行病学调查。

2.       能对样品中 EMCV 进行快速检测,具有良好的特异性和敏感性。

3.       使用一管式 RT-PCR 试剂盒,减少了操作步骤,降低了操作误差。


【试剂组成】

成分

50 次热封袋包装

双酶一管式 RT-PCR Buffer2×

750 μL

MMLV-Taq Mix

100 μL

EMCV 专一性引物对

200 μL

EMCV 阳性对照

50 μL

超纯水

1 mL

使用手册

1 份

【运输及保存】

低温运输,-20℃保存,保存期限一年。



【自备试剂】一管式病毒 RANout 或柱式病毒 RNAout


【注意事项】

一、样品 RNA 的制备

用自选方法纯化 EMCV 样品的 RNA ,也可以另购本公司的一管式病毒RANout 或柱式病毒 RNAout,上述两款产品跟本试剂盒兼容。

二、阳性对照

1.       为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对  照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DNA 片段作为阳性对照。

2.       使用本阳性对照时,由于其浓度较高,一定要注意不要污染其他试剂和成分。最  好在专门的区域操作。

三、设置 RT-PCR 反应(30 uL 体系)

3.      在 PCR 管中加入下列成分:

   

样品

阳性对照

阴性对照

双酶一管式 RT-PCR Buffer2×

15 uL

15 uL

15 uL

EMCV 专一性引物对

2 uL

2 uL

2 uL

样品 RNA

1-5 uL

EMCV 阳性对照

2 uL

补超纯水到

28 uL

28 uL

28 uL

MMLV-Taq Mix

2 uL

2 uL

2 uL











4.       轻柔混匀后上机,按下面参数进行 RT-PCR。

过程

温度

时间

逆转录

60℃

30 分钟

预变性

94℃

5 分钟

PCR 反应

(30 个循环)

94℃

30 s

55℃

30 s

72℃

30 s

延伸

72℃

5 分钟

5.电泳检测 RT-PCR 产物。预期的PCR 产物长度为 286 bp。


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