人胰腺星状细胞复苏/冻存－优利科（上海）生命科学有限公司

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人胰腺星状细胞

参考价：￥

型号：复苏/冻存

更新时间：2024-07-09 | 阅读：407

详情介绍

人胰腺星状细胞

产品名称：人胰腺星状细胞

产品货号：YLK-XB0533h

组织来源：胰腺组织

产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

细胞简介：

正常胰腺组织中星状细胞为静止状态，静态的胰腺星状细胞内含维生素A脂滴和油脂酸视/黄醇，并具有摄取和酯化视/黄醇的功能，但是不具备促纤维化作用。

致胰腺损伤的各种刺激因子使胰腺星状细胞活化时，其细胞内脂滴消失，转化为成肌纤维细胞样的表型细胞，具有致纤维原性和平滑肌细胞的特点：与细胞外基质的主要成分如I型、Ⅲ型胶原蛋白、纤维连接蛋白、层粘连蛋白的抗体呈强阳性染色反应。提示细胞外基质的大量合成及沉积。此过程近来已经在动物模型及慢性胰腺炎患者的胰腺组织中得到证实。原位杂交显示纤维化的胰腺中呈仅α-SMA染色阳性的细胞正是产生胶原的主要来源。

细胞特性

1) 细胞来源于人正常胰腺组织。

2) 细胞鉴定：结蛋白（Desmin)或者平滑肌肌动蛋白（α-SMA）免疫荧光染色为阳性。

3) 经鉴定细胞纯度高于90%。

4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。

5) 细胞生长方式：长梭状，星状细胞，贴壁培养。

质量检测

优利科生物实验室分离的该细胞经Vim entin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原体、细菌、酵母和真菌等。

培养信息

培养基：含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptom ycin等

换液频率：每2-3天换液一次

生长特性：贴壁

细胞形态：成纤维细胞样

传代特性：可传2-3代

传代比例：1:2

消化液：0. 25% 胰蛋白/酶

培养条件：气相：空气，95% 。C O2，5%

该细胞体外培养周期有限。建议使用优利科生物配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。

客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作

1. 取出T25细胞培养瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h，以稳定细胞状态。

2. 贴壁细胞消化

1) 吸出T25细胞培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次。

2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培养瓶中，轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后，吸出多余胰蛋白/酶消化液，37℃温浴1-3min。倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后，再加入5ml完培终止消化。

3) 用吸管轻轻吹打混匀，按传代比例接种T25培养瓶传代，然后补充新鲜的完培至5mL，置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养。

4) 待细胞贴壁后，培养观察。之后按照换液频率更换新鲜的完培。

3. 细胞收货脱落

1) 收集所有细胞悬液，1000rpm，离心5min，保留沉淀。

2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至离心管中，重悬沉淀，放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min)。消化完向离心管内加入5ml完培终止消化。

3) 经1000rpm离心5min丢弃上清，用5ml完培基重悬沉淀，接种于新的培养瓶内。

4) 待细胞贴壁后，培养观察。之后按照换液频率更换新鲜的完培(37℃预热)。

5) 原瓶内贴壁细胞按正常消化处理。

4. 细胞实验

因原代细胞贴壁特殊性，贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿（如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等）时，需要对实验器皿进行包被，以增强细胞贴壁性，避免细胞因没贴好影响实验。包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2），多聚赖氨酸PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%），依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。

注意事项

1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。

2. 在细胞培养过程中，请注意保持无菌操作。

3. 传代培养过程中，胰/酶消化时间不宜过长，否则会影响细胞贴壁及其生长状态。

4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和公司技术部沟通。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和我们联系，详尽告知细胞的具体情况，以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。