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RF/6A猴脉络膜-视网膜(内皮)细胞
简称:RF/6A
中文名:猴脉络膜-视网膜(内皮)细胞
别名:RF/6A (猴脉络膜-视网膜内皮细胞)
种属:恒河猴
来源:脉络膜-视网膜;内皮细胞;自发永生
培养基:DMEM
状态:贴壁
NOTE: FOR RESEARCH USE ONLY.
细胞培养操作步骤:
1. 吸走多余培养基,加入3-5mL PBS后轻轻晃动培养瓶润洗细胞;
2. 吸干净PBS后加入1mL 0.25%胰酶-0.53mM EDTA,轻轻摇晃培养皿使胰酶浸没细胞表面,培养瓶放37度培养箱消化;
(细胞对于消化比较敏感,消化过度会严重影响细胞状态,导致细胞传代死亡漂浮或者传代后不长。细胞消化到细胞间隙变大但未脱落,可以轻轻吹下时即可终止,禁止消化到细胞*漂浮。混匀细胞时尽量轻柔,不要吹出大量气泡。)
3. 加入6-8ml*培养基终止消化,轻轻吹下细胞混匀;
4. 将混匀的细胞1000rpm(约150g)离心3min,弃上清,再用新鲜培养基重悬37度培养箱继续培养;
传代比例: 不同细胞生长速度不一,具体传代比例视细胞生长速度而定,大部分细胞适用1:3-1:4传代,生长较慢的细胞可以1:2传代。
Cell cryopreservation
1.冻存液:92%*培养基+8%DMSO(可以根据实验室条件自行选择)
2.降温步骤:4度10min,-20度2h,-80过夜后液氮保存。
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