荧光PCR检测试剂盒是一种基于聚合酶链式反应(PCR)结合荧光标记技术的分子生物学工具,广泛应用于基因定量分析、病原体检测等领域。以下是其核心作用及储存条件的详细说明:
1. 高灵敏度的目标核酸定量
原理:利用Taq DNA聚合酶在扩增过程中释放的荧光信号强度与模板DNA含量成正比的关系,实现对特定基因片段的实时动态检测。可检测低至单拷贝水平的核酸分子。
应用场景:
病毒载量测定;
肿瘤标志物微小残留病灶监测;
转基因成分筛查(GMO检测)。
2. 多重靶标同步鉴别能力
通过设计不同荧光通道的探针或引物组合,可在同一反应体系中区分多种目标序列。例如:
呼吸道合胞病毒/腺病毒/流感病毒联合检测;
SNP基因分型用于药物代谢相关多态性分析。
3. 封闭体系降低污染风险
采用预混液形式提供所有必需组分,减少移液步骤带来的交叉污染概率。配合带滤芯的枪头使用,可将气溶胶污染率控制在0.1%以下。
4. 自动化兼容与标准化输出
适配主流qPCR仪器,内置ROX校正染料自动扣除背景干扰。配套软件支持熔解曲线分析、标准曲线绘制等功能,确保结果可重复性CV值<5%。
二、荧光PCR检测试剂盒储存特殊注意事项:
光敏感性防护:荧光染料见光易淬灭,需使用不透明铝箔袋包装并储存于暗处。实验操作应在弱红光照明下进行。
热稳定性限制:某些热启动聚合酶制剂在室温放置超过4小时后活性下降超20%,必须严格遵循“用多少取多少”原则。
磁珠法提取试剂兼容性:若配套核酸提取步骤,需验证磁珠与试剂盒缓冲液的离子强度匹配度,防止结合效率下降。
