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使用水通道蛋白ELISA试剂盒的详细流程
更新时间:2023-10-19      阅读:283
  水通道蛋白ELISA试剂盒是一种特异性检测试剂盒,用于定量检测组织或细胞中水通道蛋白的表达水平。该试剂盒采用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)的方法,特异性检测水通道蛋白的抗原抗体反应。在ELISA试剂盒中,抗原先与特异性抗体结合,随后加入酶标记的二抗与抗体结合,最后加入底物显色,颜色的深浅与待测样本中水通道蛋白的含量呈正相关。
  水通道蛋白ELISA试剂盒的使用流程:
  样品准备:组织或细胞样品需用冰冷的生理盐水或PBS洗涤三次,再用匀浆器将组织破碎或用胰蛋白酶消化细胞,制备成细胞上清液或组织匀浆液。
  加样:将样品加入ELISA板中,每孔加入100μL。同时设置标准品孔和空白孔。
  孵育:将ELISA板置于37℃孵育一定时间,让样品与抗原充分结合。
  洗涤:用洗涤液将未结合的物质洗去,保证ELISA板中仅存在特异性结合的抗体和抗原。
  加酶标二抗:向ELISA板中加入酶标记的二抗,每孔加入100μL。
  孵育:将ELISA板再次置于37℃孵育一定时间,让酶标记的二抗与抗体充分结合。
  洗涤:用洗涤液将未结合的物质洗去。
  加底物:向ELISA板中加入底物溶液,每孔加入100μL。
  测定:用酶标仪测定ELISA板中各孔的光密度值,根据标准品曲线计算待测样本中水通道蛋白的含量。
  水通道蛋白ELISA试剂盒使用要求如下:
  试剂盒应从冰箱取出后在室温下平衡一段时间后再使用。
  加样时应准确、迅速,避免样品外溢或产生气泡。
  孵育时应注意温度和时间,以保证抗原抗体充分结合。
  洗涤时应保证每孔充分洗涤,避免残留物影响检测结果。
  加底物时应避免气泡产生,影响光吸收值。
  试剂盒中各组分不得交叉污染,否则会导致检测结果异常。
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